Compensação de citometria de fluxo

Compensação na citometria de fluxo é um processo crucial que corrige a sobreposição de sinais fluorescentes entre canais devido aos espectros de emissão sobrepostos de diferentes fluorocromos. Essa sobreposição pode levar a uma interpretação incorreta dos dados, pois os sinais de múltiplos fluorocromos podem interferir uns com os outros, tornando difícil distinguir entre diferentes populações celulares. Para alcançar uma compensação precisa, os pesquisadores frequentemente utilizam esferas de compensação e padrões de compensação.

Esferas de compensação são partículas sintéticas que emitem sinais fluorescentes específicos e servem como controles confiáveis para determinar os coeficientes de sobreposição. Essas esferas são projetadas para ter características de fluorescência conhecidas, permitindo a calibração precisa dos instrumentos de citometria de fluxo. Estudos mostraram que o uso de esferas de compensação pode agilizar o processo de compensação, fornecendo resultados consistentes em experimentos, especialmente em ensaios policromáticos, onde múltiplos fluorocromos são usados simultaneamente.

Padrões de compensação, por outro lado, referem-se aos protocolos estabelecidos e controles utilizados durante o processo de compensação. Esses padrões ajudam a garantir que as configurações de compensação sejam ajustadas com precisão com base nas características específicas dos fluorocromos empregados em um experimento.

O uso tanto de esferas de compensação quanto de padrões melhora a confiabilidade dos dados de citometria de fluxo ao minimizar os erros associados ao sobreposição espectral.