Um fluorômetro é um instrumento sofisticado projetado para medir a fluorescência emitida por uma amostra depois de ser excitada por uma luz com uma determinada comprimento de onda. Este dispositivo é crucial em várias áreas científicas, incluindo bioquímica, monitoramento ambiental e diagnóstico médico, onde ajuda a quantificar a presença e a concentração de moléculas fluorescentes, conhecidas como fluoróforos.

Princípio de operação

Fluorescência ocorre quando uma substância absorve luz em uma determinada comprimento de onda e a reemite em uma comprimento de onda maior. Um fluorômetro geralmente consiste em vários componentes principais:

• Fonte de luz: Geralmente uma lâmpada de xenônio ou laser que fornece a luz de excitação.
• Monocromadores ou filtros: Estes selecionam os comprimentos de onda específicos da luz usados para excitação e emissão. Fluorômetros com filtros usam filtros ópticos, enquanto espectrofluorômetros utilizam monocromadores para maior flexibilidade na seleção de comprimento de onda.
• Suporte para amostra (Cuveta): Este é o lugar onde a amostra é colocada para análise. Deve ser feito de materiais que não fluoresçam nos comprimentos de onda utilizados.
• Detector: Comumente um tubo fotomultiplicador (PMT) ou um dispositivo acoplado por carga (CCD), que mede a intensidade da fluorescência emitida.

Tipos de fluorômetros

Existem dois principais tipos de fluorômetros:

• Fluorômetros com filtro: Estes geralmente são mais baratos e usam filtros óticos fixos para selecionar os comprimentos de onda de excitação e emissão. São mais simples, mas oferecem menor sensibilidade e resolução em comparação com espectrofluorômetros.
• Espectrofluorômetros: Estes utilizam monocromadores para selecionar os comprimentos de onda, proporcionando maior flexibilidade e sensibilidade. Eles podem ser ajustados para uma ampla gama de comprimentos de onda, tornando-os adequados para análises mais complexas.

Aplicações

Fluorômetros são amplamente utilizados em:

• Pesquisa biológica: Para quantificar ácidos nucleicos e proteínas em amostras, frequentemente em concentrações muito baixas (até partes por trilhão).
• Monitoramento ambiental: Para detectar poluentes ou monitorar processos biológicos em ecossistemas.
• Diagnóstico médico: Em ensaios que requerem alta sensibilidade para detectar biomoléculas específicas.
• Aplicações industriais: Como controle de qualidade em produtos farmacêuticos e alimentícios.