Normas de compensação em citometria de fluxo são essenciais para corrigir o spillover de fluorescência, que ocorre quando os espectros de emissão de diferentes fluorocromos se sobrepõem. Essa sobreposição pode levar a interpretações incorretas dos dados em ensaios multicoloridos, impactando significativamente a confiabilidade dos resultados experimentais. Para lidar com esses desafios, os pesquisadores devem utilizar estratégias de compensação eficazes que incorporem diversos controles e reagentes. Essas normas geralmente incluem:

• Controles de uma única coloração: São fundamentais para determinar os coeficientes de spillover de cada fluorocromo. Ao analisar os controles de uma única coloração, os cientistas podem quantificar quanto o sinal de um fluorocromo contamina outro canal, permitindo ajustes precisos durante a análise dos dados.

• Controles de compensação multicoloridos: Esses controles simulam condições experimentais realistas, fornecendo uma visão abrangente de como múltiplos fluorocromos interagem dentro de uma amostra. Para alcançar uma compensação precisa, é crucial usar controles apropriados que coincidam de perto com as amostras experimentais. Isso garante que os coeficientes de spillover derivados dos controles de uma única coloração sejam relevantes e aplicáveis aos painéis multicoloridos sendo analisados.

Ao usar essas normas de compensação, os pesquisadores podem garantir que suas análises de citometria de fluxo reflitam com precisão os verdadeiros fenômenos biológicos, em vez de artefatos decorrentes da sobreposição espectral.