La tinción Oil Red O se basa en el uso de un lipocromo (colorante liposoluble) y un colorante azoico utilizado para la visualización de triglicéridos neutros y secciones de tejido lipídico.

El Oil Red O es uno de los colorantes Sudán, como el Sudán III, el Sudán IV y el Sudán Negro B. Sin embargo, el Oil Red O ha sustituido gradualmente a los colorantes Sudán III y Sudán IV porque la coloración roja producida por el Oil Red O es mucho más intensa, lo que facilita la visualización.

La tinción Oil Red O se realiza en muestras frescas o congeladas. Los tejidos incluidos en parafina no son compatibles con esta coloración porque la preparación de los cortes y sobre todo el uso de disolventes eliminan los lípidos.

La tinción Oil Red O se basa en el uso de 4 reactivos para la tinción de células grasas según el método de Johnson.