Refolding de anticuerpos
Le proponemos replegar su proteína desnaturalizada.
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La expresión de proteínas recombinantes en E. Coli tiene el inconveniente de utilizar detergentes (por ejemplo : urea) para extraer y solubilizar las proteínas. Pero estas condiciones tienen un efecto desnaturalizante sobre las proteínas obtenidas.
A veces es necesario eliminar el desnaturalizante (por ejemplo, la urea) para volver a plegar la proteína.
Técnicas utilizadas :
- diálisis
- cromatografía intercambio tampón
- dilución rápida
- refolding en columna
Nota : Para todas estas técnicas, también es posible el uso de diversos aditivos en el tampón final para mejorar la solubilidad de las proteínas y evitar la precipitación durante el proceso de eliminación del agente desnaturalizante. Puede tratarse, por ejemplo, de detergentes (p. ej., SDS), estabilizadores (p. ej., glicerol), caótropos (p. ej., urea), sales (p. ej., citrato sódico) o quelantes (p. ej., EDTA).
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